O ensaio de Complementação de Fluorescência Bimolecular (BiFC) é um método usado para visualizar diretamente a interação proteína-proteína in vivo usando imagens de células vivas ou células fixas. … O BiFC foi descrito pela primeira vez por Hu et al.
Como funciona a complementação de fluorescência bimolecular?
O princípio de funcionamento do BiFC é baseado no desenvolvimento de um complexo fluorescente, resultado da associação de dois segmentos de uma proteína fluorescente quando estão próximos devido à interação proteína-proteína nos fragmentos, ou seja,, em BiFC, um fluoróforo é dividido em terminais amino e carboxil.
O que é o teste BiFC?
ensaio de complementação de fluorescência bimolecular (BiFC) permite a visualização simples e direta de interações de proteínas em células vivas (45). A abordagem BiFC é baseada na formação de um complexo fluorescente quando duas proteínas fundidas a fragmentos não fluorescentes de uma proteína fluorescente interagem entre si (Fig.
Por que o teste BiFC é feito?
A ideia do BiFC é expressar metades da GFP fundidas com suas proteínas de interesse Se os POIs interagirem, você pode juntar as duas metades para obter uma GFP funcional. Portanto, se houver metade de uma GFP expressa na célula, não estou surpreso que um anticorpo GFP possa detectá-la.
O BiFC é reversível?
A irreversibilidade dos complexos BiFC foi bem documentada (10), e parece que a maioria, se não todos, os sistemas BiFC baseados em proteínas fluorescentes são irreversíveis (8, 33, 43, 48–51).
