Pode-se congelar e descongelar o buffer RIPA 2-3 vezes sem perder sua potência, desde que armazenado no gelo durante o uso (20-30 min). Armazene o buffer congelado a -80 graus C.
Por quanto tempo posso manter o buffer RIPA?
1. Se o buffer for usado continuamente, é recomendado que o buffer 10x seja mantido a 4°C por 1-2 semanas. Para períodos de tempo mais longos, o tampão deve ser armazenado a -20°C. A alíquota do buffer de 10x é recomendada se muitos experimentos pequenos forem realizados.
O buffer RIPA pode ser armazenado em?
O tampão RIPA preparado deve ser dividido em alíquotas e armazenado a −20°C. Adicionar inibidores de protease e/ou fosfatase a uma alíquota descongelada antes do uso imediato. Um mililitro de tampão é suficiente para lisar aproximadamente 5 milhões de células. …
Como você armazena os lisados de RIPA?
Use lisados preparados o mais rápido possível e armazene pelo menor tempo possível. Armazene os lisados a -80℃ pelo maior tempo possível. Para lisados que precisarão ser mantidos em longo prazo, transfira os tubos recém-preparados para um freezer disponível a -80 ℃ para evitar a degradação.
Como você descongela o buffer RIPA?
Após a remoção da solução de lavagem final das células, adicione um volume apropriado de tampão RIPA (1 ml por 0,5 a 5 × 107 células) ao pellet de células e misture ou vortex brevemente para ressuspender as células completamente. Incubar no gelo ou na geladeira (2–8 °C) por cinco minutos.
