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Por que mudar o tempo de retenção em hplc?

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Por que mudar o tempo de retenção em hplc?
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Vídeo: Por que mudar o tempo de retenção em hplc?

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Vídeo: HPLC Troubleshooting: variação de tempo de retenção 2024, Maio
Anonim

Relacionado ao último fenômeno estão as mudanças nos tempos de retenção que são causadas por um aumento da contrapressão na coluna. O aumento da contrapressão pode indicar uma contaminação da coluna, mas mesmo uma frita entupida pode afetar os tempos de retenção.

O que causa o deslocamento do tempo de retenção?

Uma das causas mais comuns de mudanças no tempo de retenção em separações por LC de fase reversa é uma pequena alteração na concentração do solvente orgânico, geralmente metanol ou acetonitrila Isso pode acontecer a partir de um pequeno erro na formulação ou uma mudança na composição da fase móvel se um solvente evaporar ao longo do tempo.

O que aumenta o tempo de retenção?

Se a polaridade da fase estacionária e do composto forem semelhantes, o tempo de retenção aumenta porque o composto interage mais fortemente com a fase estacionária. Como resultado, compostos polares têm tempos de retenção longos em fases estacionárias polares e tempos de retenção mais curtos em colunas não polares usando a mesma temperatura.

Quais fatores influenciam o tempo de retenção?

O tempo de retenção depende de vários fatores: condições de análise, tipo de coluna, dimensão da coluna, degradação da coluna, existência de pontos ativos como contaminação. e assim por diante. Se estiver citando um exemplo familiar, todos os picos aparecem em tempos mais curtos quando você corta parte da coluna.

O que afeta o tempo de retenção na cromatografia?

Uma mudança no programa de temperatura geralmente causa uma mudança no tempo de retenção de todos os picos. Uma mudança na temperatura inicial, no tempo de retenção inicial ou na taxa de rampa pode afetar todos os picos. Os tempos de retenção aumentam com uma temperatura inicial mais baixa, um tempo de espera inicial mais longo ou uma taxa de rampa mais lenta.

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