Por que usamos nitrocelulose em western blot?

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Por que usamos nitrocelulose em western blot?
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Vídeo: Por que usamos nitrocelulose em western blot?

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Anonim

Membranas de nitrocelulose são uma matriz popular usada em transferência de proteínas por causa de sua alta afinidade de ligação a proteínas, compatibilidade com uma variedade de métodos de detecção (quimioluminescência, cromogênico e fluorescência), e a capacidade de imobilizar proteínas, glicoproteínas ou ácidos nucleicos.

Por que usamos nitrocelulose?

Uma lâmina de nitrocelulose, membrana de nitrocelulose ou papel de nitrocelulose é uma membrana pegajosa usada para imobilizar ácidos nucléicos em Southern blots e Northern blots Também é usada para imobilização de proteínas em Western blots blots e microscopia de força atômica para sua afinidade inespecífica por aminoácidos.

Por que o PVDF é usado em Western blotting?

Western blotting usando membranas de difluoreto de polivinilideno (PVDF) é uma das técnicas mais populares para detecção e caracterização de proteínas. Se esta técnica for combinada com imunodetecção, o comportamento de uma determinada proteína pode ser esclarecido.

A membrana de nitrocelulose é hidrofóbica?

Ao contrário da poliacrilamida, a nitrocelulose fornece um suporte adequado para posterior coloração de proteínas ou caracterização imunoquímica. A ligação à nitrocelulose é predominantemente mediada por interação hidrofóbica (Schneider, 1980), embora forças eletrostáticas também possam estar envolvidas (Farrah et al., 1981.

Qual é melhor nitrocelulose ou PVDF?

Enquanto a nitrocelulose é quebradiça e frágil, PVDF é mais durável e tem maior resistência química, tornando-a ideal para aplicações de reprovação e sequenciamento. A nitrocelulose pode ser difícil de remover e reprovar sem perder o sinal.

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